全自動核酸提取儀是分子診斷常用工具,分子診斷是以核酸作為檢測對象,主要應用于臨床各科的診斷中,如腫瘤、感染、遺傳等各方面,而核酸提取是分子診斷實驗的“第一步”。近年來,磁珠已成為核酸提取過程中常用的工具之一。
磁珠表面覆蓋有一層TiO2材料,可以選擇性的與磷酸化的氨基酸殘基:絲氨酸(Ser)、酪氨酸(Tyr)、蘇氨酸(Thr)結合,而與酸性的氨基酸殘基的非特異性結合最小。與傳統的IMAC技術相比,其靈敏度提高了1000倍,富集后磷酸化蛋白的質譜檢出限達100fmol。
谷胱甘肽(GSH)磁珠
該磁珠表面包被有瓊脂糖,并偶聯有谷胱甘肽,可以特異性的與谷胱甘肽-S-轉移酶(GST)結合,因而可用于純化帶有GST標簽的重組蛋白。TALON"磁珠。TALON磁珠的原理是基于采用Co離子的固定化金屬離子親和技術(IMAC),可用于純化帶有組氨酸標簽(6xHis)的重組蛋白。
ProteinA和ProteinG磁珠
帶有ProteinA或ProteinG基團的磁珠,可廣泛應用于IgG的純化、免疫沉淀(IP)和免疫共沉淀(Co-IP)等。
硅質膜磁珠
這是一類最早出現的產品,廣泛應用于DNA、RNA的純化。其原理類似于使用硅質膜的離心柱,磁珠在高鹽條件下與核酸結合,而在低鹽環(huán)境下被洗脫,可用于全血、組織、細菌、病毒、植物等的核酸純化。
反相RPC磁珠
類似于反向層析的原理,可用于多肽的分離純化。Jimenez等使用KingFisher96和Dynabead?RPC18磁珠僅需20min就可以平行處理96個樣品,用于與疾病相關的血清中肽段表達譜的研究。
ChargeSwitch磁珠
ChargeSwitch磁珠的原理類似于離子交換技術,磁珠在pH&6.5的緩沖液中帶正電,可與帶負電的核酸結合;在pH<8.5的緩沖液中磁珠帶負電,使得之前吸附的核酸從磁珠上釋放。ChargeSwitch磁珠可在KingFisher平臺上使用。