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數字放射自顯影系統檢測聚丙烯酰胺凝膠中的DNA

更新時間:2021-10-15瀏覽:1032次
  數字放射自顯影系統采用PIM(平行電離倍增)技術,利用核素直接標記藥物分子,突破了傳統的乳膠感光成像,采用新氣相傳感技術,全數字化實時成像技術,可以將數月的曝光時間縮短至數小時,縮減實驗時間,更快速得知標本中標記物的準確位置和數量,對標記上放射性的化合物進行定位或相對定量測定,達到高通量測試。用于研究標記化合物在機體、組織和細胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用機理、作用部位等等。
 
  數字放射自顯影系統可以檢測丙烯酰胺凝膠電泳分離的放射性DNA條帶。含有放射性DNA的聚丙烯酰胺分析凝膠,在放射自顯影前通常要固定和干燥。然而,若要從凝膠中回收放射性DNA條帶,則不應固定和干燥。
 
  數字放射自顯影系統檢測方法:
 
  1、將凝膠及其附著的玻璃板于7%乙酸中浸5min。小心地從固定液中拿起玻璃板以取出凝膠。
 
  2、去離子水短暫漂洗凝膠,用一疊Kimwipes紙蘸去凝膠表面多余的液體。
 
  3、(可做或不做)將凝膠放在Whatman3MM紙上,用市售凝膠干燥機干燥。
 
  4、將凝膠及支撐的玻璃板包在SaranWrap膜中,用梳子寬的一端或折疊的Kimwipe紙除去SaranWrap膜中的氣泡或皺褶。
 
  5、將放射性墨水或化學發光標準參照物標記的黏性小標簽貼于SaranWmp膜表面,以便對準凝膠與膠片的位置。用透明膠帶覆蓋放射性墨水標簽,以免污染膠片盒和增感屏。
 
  6、將凝膠倒置,按以下步驟對X射線片(如KodakXAR-5或同類產品)曝光:
 
  (1)在暗室里,用膠帶將密封的凝膠與裁成玻璃板大小的一張X射線片粘在一起。
 
  (2)用不透光的鋁箔將凝膠與膠片包好。
 
  (3)于室溫或-70℃曝光合適的時間,增感屏使用與否均可。
 
  (4)按制造商的建議顯影、定影和干燥X射線膠片。

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